오늘은 그램 양성란균 Strep tococcus 안에 대해서 설명하도록 하겠습니다그램 양성란균이므로 Gramstain으로 1차 염색시약은 crystal violet에 더 많이 함유되어 있고 현미경으로는 푸른색의 둥근 모양으로 보이죠?- 그램염색 방법에 대한 글은 지난 번에 작성되었습니다! 참고하세요~ Streptococcus는 쇄립균 또는 쌍립균의 모습이어서 이런 형태입니다.
왼쪽부터 쇄란균, 쌍란균, 포도우란균(Staphylococcus)
균을 동정하기 위해 배지에 자란 균을 슬라이드에 넣고 염색한 후 현미경으로 살펴보면 일차적으로 균의 형태를 확인하고, 몇 가지 생화학적 검사를 하여 균을 동정하는 방법을 배워 나갑시다.
Streptococcus 에는 병원미생물 중 Streptococcus pyogenes , Streptococcus agalactiae , Viridans Streptococcus , Streptococcus pneumoniae , Enterococcus faecalis , Enterococcus faecium , Streptococcus eauius , Streptococcus bovis 등이 주로 동정이 됩니다 正直 もっと 多い です 。 많지만 그래도 이 정도는 알고 있어야 해요! 특히 분홍색 글씨를 잘 보세요.~균의 특징은 정리하여 다음 투고에 게재합니다.지난번 streptococcus의 생화학적 검사를 통해 균을 동정하는 방법에 대한 글을 작성했는데 생각보다 생화… m.blog.naver.com
이제 위 균은 Group으로 구분됩니다세포벽의 다당체 항원성(항체를 형성할 수 있는 능력)에 따라 혈청형으로 총 20군(Group A~T)으로 분류됩니다. Lacefield Group균 분리라고 합니다.오늘 볼 병원 미생물은 Group A, B, C, D가 있어요.
그리고, 이것들은 배지에서 자라는 데에 영양이 필요하기 때문에, 배지에 영양이 풍부한 혈액이 들어 있는 BAP 배지에 배양합니다.용혈을 일으키는 균으로 BAP 배지에 배양을 하면 용혈성을 볼 수 있습니다.알파(불완전용 구멍), 베타(완전용 구멍), 감마(불완전용 구멍으로 알파, 베타 모두 없는 것) 분류한다.알파 용혈 녹색 억제대가 마을 주변에 보이는 베타 용혈 – 이중 용혈대이고 안쪽은 용혈이 없고 바깥쪽은 넓게 마을 주위에 맑은 억제대가 보이는 감마 용혈 알파도 아닌 베타도 아닌 거 제가 그림으로 최대한 설명을… 비슷하게 그려보겠습니다 구글에 아주 잘 나와 있으니까 검색하셔도 돼요
이제 본격적으로 생화학적 검사를 설명해드리겠습니다~
- Bacitracin 감수성검사 Bacitracin이라는 항생제로서 Group A만을 선택적으로 억제함으로써 동정할 수 있는 검사입니다. BAP 배지에 균 접종 후 Bacitracin 디스크를 올려 배양 후 억제대를 관찰합니다.억제대가 12mm 이상 나오면 감수성으로 판단해서 Group A인 S.pyogenes임을 알 수 있습니다.
2. CAMP test S. agalactiae를 동정하는 검사입니다.agalactiae는 CAMP효소를 가지고 있기 때문에 용혈대가 좁은 S.agalactiae 용혈대를 확인하는 검사입니다.CAMP효소(S.agalactiae)+베타용혈(S.aureus)=화살촉상(큰 용혈대) BAP 배지에 S.agalactiae와 S.agalactiae를 수직으로 접종 후 배양하여 용혈대를 확인, 화살촉의 형태가 관찰되면 S.agalactiae이다.상하로 그려진 직선은 S.aureus, 화살촉 모양의 선은 S, agalactiae 입니다!
3. Hippirate test(마뇨산 가수분해시험) S.agalactiae와 베타 용혈성 쇄립균 감별시험입니다.hippuricase = glycin + benzoic acidglycin + ninhydrin = violet ( S . agalactiae ) b
4.6.5% NaCl 내성 시험 Enteroccus 분리 시험인 6.5% NaCl에서 증식하는지 여부를 보는 시험이다.성장하면 내성, 내성이면 Enterococcus 저성장이면 감수성, 감수성이면 non Enteroccus
5. 파일 esculintest Enterococcus와 Viridance의 분리 시험이다. Enterococcus에는 케이라인 가수분해 효소를 가지고 있습니다.File esculin 평판배지 또는 사면배지에 균 접종 후 배양배지에는 40% esculin 평판배지 + 지시약 ferric citrate 검은색이 나타나면 Enterococcus
6. PYR test (PYR 가수분해 시험) pyrrolidonylary lamidase 효소의 유무를 측정하는 검사입니다 S.pyogenes, Enteroccus 동정 시험입니다. 병원에서 쓰지 않는 시험입니다. 하지만 국시에 나올 수 있다는 것~ 하지만 국시에 나올 수 있다는 것~ 이런 검사가 있다는 것~
7. SXT 항생제 테스트용 BAP 배지에 균을 접종하고 SXT 디스크에서 접종하여 배양 후 억제대 확인!억제대가 없으면 내성, 내성의 경우는 S.pyogenes, S.agalactiae의 국시에 이렇게 간단한 내용만 표시되어 있기 때문에 알아두셔도 됩니다.참고로 제가 국시 공부를 할 때 이랬어요.
8. Optochin 감수성 시험 S.pneumoniae 분리 시험입니다.마찬가지로 BAP 배지에 균과 항생제를 접종하여 배양 후 억제대를 확인하고 14mm~16mm면 감수성이며, 감수성이면 S.pneumoniae 중요한 것은 Optochin 화학명을 알아두시기 바랍니다.Ethylhydrocupreire Hydrochlorides ( HCl )
이미지의 회색 부분은 균이 죽은 억제대입니다
9. Bile Solubility test (담즙용해시험) S. pneumoniae 동정시험 Bile 성분이 들어 있는 배지에 균을 접종한 후 배양담즙이 들어있던 흰색배지가 S. pneumoniae의 용해촉진으로 투명해진다.
10. 협막팽창 (capsule swelling test) = Neufeld Quellung test S, pneumoniae의 최종 동점 시험이다. 현미경을 들여다보면 좁다란 막이 팽창되어 있음을 알 수 있다.
지금까지~ Streptococcus 중 생화학적 시험 설명했습니다! 그림이 아직 미숙하지만 추가적인 그림 설명이 필요하다고 느끼신다면 스스로 구글을 찾아보세요!더 궁금한 점이나 수정사항이 필요한 부분을 발견하시면 코멘트 부탁드립니다.다음 글에 Streptococcus 속의 균을 정리해서 올리겠습니다!안농.